高纯度木瓜蛋白酶的分离纯化和性质研究

摘要

目的 建立木瓜蛋白酶的分离纯化工艺路径.方法 采用初步采集处理,20%,40%硫酸铵分级沉淀、SP-sephadex C50柱色谱、羟基磷灰石柱色谱,从番木瓜乳汁中分离纯化木瓜蛋白酶.结果 获得比活为1 184 U/mg的纯酶,活力回收率为55.79%,纯化的酶经SDS-PAGE呈单一条带,高效液相色谱呈单一条带,纯度达到99.31%.该酶耐高温,最适pH值为7.2,对酪蛋白的动力学常数(Km)为3.5×10-5 mol/L.结论 应用此方法成功纯化了高纯度的木瓜蛋白酶.