98株鸭源致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因型与耐药表型的比较

摘要

旨在调查鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷修饰酶耐药基因(AMEs基因)的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类抗生素耐药表型的相关性.对98株鸭致病性大肠杆菌采用了K-B法,选用氨基糖苷类抗生素链霉素,新霉素、庆大霉素、阿米卡星,大观霉素和卡那霉素进行药敏试验,用建立的检测氨基糖苷类AMEs主要基因的四重PCR方法对上述菌株进行分子检测,并随机选取耐药基因ant(3")-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa和aph(3')-Ⅱa各3个阳性扩增进行克隆测序,对药敏试验结果和基因检测结果进行比较分析.结果表明,98株鸭致病性大肠杆菌有67株对上述氨基糖苷类药物中的一种或多种耐药,耐药率为68.4 %(67/98);有49株扩增出AMEs基因,AMEs基因的检出率为50%(49/98),其中ant(3')-Ⅰa的检出率为30.6%(30/98),aac(3)-Ⅱ a为13.3%(13/98),aph(3')-Ⅱa为3.1%(3/98),ant(3")-Ⅰ a+aac(3)-Ⅱa为2.0%(2/98),aac(3)-Ⅱa+aph(3')-Ⅱa为1.0%(1/98),未检出aac(6')-Ⅰb基因;序列分析结果表明,扩增产物与GenBank中的相应序列有很高的同源性(＞99%)AMEs耐药基因与耐药表型的符合率为73.1 0/,(49/67),符合率从高到低依次为大观霉素60%(3/5)、庆大霉素55%(11/20)、链霉素33.3%(22/66)、卡那霉素19%(4/21)、新霉素12.5%(1/8)、阿米卡星0%(0/3).另外有4株细菌检测到相关耐药基因但耐药表型为敏感,而有22株耐药表型为耐药却未检测到相关耐药基因.鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因以ant(3")-Ⅰa和aac(3)-Ⅱ a两种为主,耐药性与相关耐药基因的检出率基本星正相关.