影响水牛胎儿成纤维细胞转染效率的因素

摘要

实验对电穿孔法和阳离子脂质体法转染水牛胎儿成纤维细胞的条件进行了系统摸索,获得了较好的DNA转染参数.电穿孔法转染时脉冲时间为15 ms,电场强度为40～50V/m时,细胞的死亡率处于20%～50%之间,比较适合外源.DNA转入水牛胎儿成纤维细胞.将脂质体与DNA的比例控制在8μL:2μg,可获得较高的转染率.相同培养条件下,脂质体法比电穿孔能获得更多的转基因抗性细胞集落,转染DNA的纯度和细胞的状态也明显影响脂质体法的转染效率.