细胞转染

摘要： 目的:构建淋巴细胞活化因子3(LAG3)-mCherry红色荧光蛋白的LAG3-mCherry慢病毒表达载体,转染HEK293T细胞获得稳定表达LAG3-mCherry融合蛋白的细胞系,探讨LAG3-mCherry融合蛋白在HEK293T细胞中的定位。方法:将LAG3质粒和带有mCherry的慢病毒载体分别用限制性内切酶EcoRⅠ和NotⅠ进行双酶切,构建pEZ-LAG3-mCherry表达载体。将测序正确的质粒利用Lipofectamine 3000转染HEK293T细胞,利用荧光显微镜观察LAG3-mCherry在HEK293T细胞中的表达定位,Western blotting法检测LAG3-mCherry融合蛋白的表达情况。结果:酶切鉴定结果,电泳后重组质粒双酶切后可见约为8012和2066 bp大小的2条DNA条带,与pEZ-Lv-mCherry载体及LAG3基因片段大小相符;DNA测序结果,LAG3基因成功插入到慢病毒表达载体中。荧光显微镜观察,LAG3-mCherry融合蛋白主要在HEK293T细胞膜上表达,少量蛋白滞留在细胞质中。Western blotting法检测,在转染pEZ-LAG3-mCherry质粒中检测到LAG3对应特异性条带。结论:成功构建了LAG3-mCherry慢病毒表达载体pEZ-LAG3-mCherry。通过稳定转染成功制备了稳定表达LAG3-mCherry的细胞系。LAG3-mCherry融合蛋白主要分布于HEK293T细胞的细胞膜上。

摘要： 目的:通过慢病毒载体沉默IL-33在间充质干细胞(MSCs)中的表达,探讨IL-33基因沉默后对MSCs增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:通过构建IL-33基因的shRNA慢病毒载体转染MSCs;应用RT-PCR及免疫印迹方法检测IL-33在MSCs中的表达情况及IL-33基因的沉默效果;通过Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况,进而检测IL-33基因沉默后对MSCs增殖、凋亡的影响,并通过免疫印迹检测AKT磷酸化水平。结果:细胞转染及免疫印迹实验表明IL-33 shRNA慢病毒载体构建成功,并干扰了IL-33在MSCs中的表达;稳定沉默IL-33基因后,MTT细胞生长实验表明MSCs增殖能力减弱(P<0.05);流式细胞技术和免疫印迹技术检测显示IL-33基因沉默后可提高MSCs对外界凋亡诱导物的敏感性,且引起细胞survivin基因表达的下调。结论:IL-33基因可能与MSCs增殖和抗凋亡有关,进而参与MSCs的发育和存活,IL-33稳定沉默后通过削弱AKT磷酸化可抑制MSCs增殖。

摘要： 为考察BMP-2(骨形态发生蛋白2,Bone Morphogenetic Protein 2,简称BMP-2)基因转染大鼠BMSCs(骨髓间充质干细胞,Bone Mesenchymal Stem Cells,简称BMSCs)目的基因表达及对BMSCs增殖的影响,通过实验将BMSCs分离培养并进行扩增,构建携带含有BMP-2基因的重组慢病毒表达载体,转染至BMSCs,利用倒置显微镜观察转染后绿色荧光蛋白基因的表达,通过RT-PCR(反转录聚合酶链反应,Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,简称RT-PCR)检测转染后细胞BMP-2的表达水平,采用蛋白质印迹法(Western Blotting)分析BMP-2在细胞内的表达情况,使用ELISA(酶联免疫吸附测定,Enzyme Linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)测定细胞培养上清液中目的蛋白质量浓度,细胞毒性实验MTT(噻唑蓝3-(4,5)-dimethylthi-ahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,简称MTT)法测定BMSCs增殖能力。结果表明,实验成功构建了含有BMP-2基因的重组慢病毒表达载体,倒置荧光显微镜下观察到转染BMSCs发出稳定的绿色荧光信号,转染细胞的BMP-2 mRNA(Messenger RNA,信使核糖核酸)表达水平明显高于未转染细胞,转染细胞裂解液中检测出BMP-2条带,转染细胞的培养上清液中BMP-2值明显高于未转染细胞的。转染BMSCs的增殖速度显著高于空载体BMSCs和未转染BMSCs。

摘要： 背景导致喉癌患者死亡的主要原因是复发和转移,喉癌侵袭转移的分子机制已成为当前研究的重点。目的研究microRNA-25(miR-25)在喉鳞癌Hep-2细胞体外侵袭转移中的调控作用。方法应用微小RNA过表达载体(mimic)和抑制载体(inhibitor)转染Hep-2细胞,分别增加和抑制Hep-2细胞中miR-25的表达,Transwell法和细胞划痕实验检测Hep-2细胞侵袭迁移能力的变化,MTT法检测细胞增殖能力变化,绘制细胞生长曲线。结果上调Hep-2细胞中miR-25表达后,Transwell实验和细胞划痕实验显示Hep-2细胞的体外侵袭和迁移能力显著低于正常对照组(P<0.01),MTT检测结果显示过表达miR-25组Hep-2细胞增殖能力亦显著降低。而抑制miR-25表达后,Hep-2细胞体外侵袭、迁移和增殖能力均显著增强。结论miR-25的表达量显著影响喉鳞癌Hep-2细胞体外侵袭、迁移和增殖能力,提示miR-25可能是抑制喉鳞癌转移的一个有效靶点。

摘要： 利用大肠杆菌表达系统原核表达并纯化小热休克蛋白-细胞穿膜肽融合蛋白(Hsp-Tat);用动态光散射和透射电镜成像分析Hsp-Tat纳米粒的粒径和形貌;用噻唑蓝(MTT)法和活/死细胞染色法研究蛋白纳米粒的细胞相容性;用凝胶阻滞实验检测纳米粒的小干扰RNA(siRNA)复合特性;用激光共聚焦荧光显微镜成像研究蛋白纳米粒的siRNA胞内递送能力.实验结果表明:亲和层析得到高纯度的Hsp-Tat融合蛋白,融合蛋白可自组装成40.2 nm空心球形结构;蛋白纳米粒在HEK-293T细胞上显示出良好的细胞相容性;Hsp-Tat NP与siRNA形成的复合物可阻止siRNA在琼脂糖凝胶中迁移;Hsp-Tat纳米粒能将Cy3-siRNA转运至细胞内,可作为一种安全高效的非病毒核酸递送载体.

摘要： 目的 探索Survivin基因在肝癌细胞增殖和凋亡过程中的表达及其临床意义.方法 将肝癌细胞分为空白组(A组)、载体病毒组(B组)、shRNA-Survivin慢病毒组(C组),使用MTT法分别检测三组肝癌细胞转染后HepG2肝癌细胞增殖率、使用AV-PI凋亡试剂盒分别检测三组肝癌细胞凋亡抑制率、使用RT-qPCR检测Survivin基因相对表达量以及凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达量.结果 A组、B组和C组肝癌细胞转染后HepG2肝癌细胞增殖率分别为(7.38±0.422)％、(8.99±0.382)％和(14.09±0.291)％,A组、B组的HepG2肝癌细胞增殖率明显低于C组,差异均具有统计学意义(P<0.05);A组、B组和C组肝癌细胞凋亡抑制率分别为(4.56±1.37)％、(3.05±1.08)％和(39.45±12.88)％,A组、B组肝癌细胞凋亡抑制率明显低于C组,差异均具有统计学意义(P<0.05);经荧光定量PCR检测,A组、B组和C组中Survivin基因相对表达量分别为0.938±0.049、0.979±0.068和0.488±0.085,A组、B组的Survivin基因相对表达量明显多于C组,差异均具有统计学意义(P<0.05);A组、B组和C组在Caspase-3中的Survivin mRNA表达量分别为0.938±0.041、0.983±0.057和0.388±0.076,A组、B组在Caspase-3中的Survivin mRNA表达量亦明显多于C组,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 Survivin基因对肝癌细胞具有促进增殖和凋亡抑制的调节作用.

摘要： 为探究TIMP1基因在绵羊卵巢组织中的生物学功能及在繁殖调控中的作用机制.研究以绵羊卵巢组织为材料,提取RNA后采用RT-PCR技术检测TIMP1基因在产多胎和产单胎绵羊卵巢组织中的差异表达情况,另外利用PCR技术扩增得到绵羊TIMP1基因编码序列,共编码207个氨基酸.构建TIMP1基因的真核表达载体,利用限制性内切酶双酶切后插入pEGFP-C1载体中.提取质粒利用脂质体转染至HEK 293F细胞中,验证真核表达载体的表达情况,为进一步探索TIMP1基因的生物学功能及繁殖调控机制提供良好的基础材料.

摘要： 目的 观察转染miR-146a对脂多糖(LPS)或β-淀粉样多肽1-42(Aβ1-42)诱导的人小胶质细胞系HMC3炎症反应及凋亡的调节作用.方法 将HMC3细胞分为LPS诱导组和Aβ1-42诱导组,各组下设3个小组.将LPS诱导组分为A、B、C组,A组转染10 nmol/L的阴性对照错义链(mimics NC);B组转染10 nmol/L的mimicis NC,继续培养24 h后,加入100 ng/mL的LPS诱导72 h;C组转染10 nmol/L的miR-146a激动剂模拟物(miR-146a mimics),继续培养24 h后,加入100 ng/mL的LPS诱导72 h.将Aβ1-42诱导组分为a、b、c组,a组转染10 nmol/L的mimicis NC;b组转染10 nmol/L的mimicis NC,继续培养24 h后,加入5μmol/L的Aβ1-42诱导12 h;c组转染10 nmol/L的miR-146a mimi?cis,继续培养24 h后,加入5μmol/L的Aβ1-42诱导12 h.取各组细胞,采用ELISA法检测各组细胞中炎症因子白介素-6(IL-6),使用流式细胞仪测算各组细胞凋亡率.结果 A、B、C组细胞中炎症因子IL-6表达水平分别为(1.73±0.04)、(15.80±0.58)、(10.73±0.43)ng/mL,其中B组与A、C组相比,P均<0.05.a、b、c组细胞中IL-6表达水平分别为(2.85±0.14)、(4.32±0.39)、(3.01±0.25)ng/mL,其中b组与a、c组相比,P均<0.05.A、B、C组细胞凋亡率分别为7.90％±0.80％、13.00％±0.64％、9.47％±0.35％,其中B组与A、C组相比,P均<0.05.a、b、c组细胞凋亡率分别为2.00％±0.60％、5.70％±0.49％、2.60％±0.70％,其中b组与a、c组相比,P均<0.05.结论 转染miR-146a对LPS或Aβ1-42诱导的HMC3炎症反应具有调节作用,并可降低其凋亡率.

摘要： 通过体外研究SBC寡肽分子与SPOP(MATH)的结合能力及其对细胞增殖的影响,初步明确SBC寡肽分子对肾癌细胞的抑制效能,为其进一步的药用开发打下坚实基础.利用细胞转染技术将SBC寡肽的编码基因转染进786-O细胞与对照HeK293,根据细胞克隆形成实验及MTT法观察细胞增殖情况.结果 表明,转染SBC寡肽基因后,786-O细胞增殖被抑制(P<0.01)SBC寡肽在抑制肾癌细胞的增殖方面可发挥重要作用.

摘要： OIP5(Opa interacting protein5)是癌睾丸抗原家族成员之一,参与多种癌症。研究显示Raf1能够直接结合OIP5,促进其表达。Raf1为一种丝/苏氨酸蛋白激酶,是Ras/Raf/MEK/ERK信号通路中的关键分子。OIP5能否通过与Raf1作用参与Ras/Raf/MEK/ERK信号通路还未见报道。因此,本研究以PC12细胞为基础,通过细胞转染Raf1和OIP5的siRNA(siRaf1,siOIP5)分别抑制Raf1和OIP5,利用Westernblot技术,验证OIP5与Raf1的作用关系及对磷酸化ERK(p-ERK)表达的影响。结果显示转染siRaf1后,有效抑制Raf1表达的同时,OIP5和p-ERK表达较对照组均显著降低;而转染siOIP5后,不仅抑制了OIP5的表达,也显著降低Raf1和p-ERK的表达。

摘要： 本文旨在探讨抗NMDAR抗体在海马神经元上的作用位点,利用HEK293细胞转染表达NMDAR亚基的方法探寻抗NMDAR脑炎的临床检测方法.用实验组(临床确诊的抗NMDAR脑炎患者)与对照组(健康体检者或非感染免疫相关疾病患者)的血清和/或脑脊液分别孵育鼠海马神经元,采用单标记或双标记的免疫荧光方法,利用激光共聚焦显微镜观察抗NMDAR抗体在鼠海马神经元上的作用位点;将SD大鼠腹腔注射麻醉后,进行常规灌注固定,断头取脑,蔗糖沉淀,用冰冻切片机做连续冠状切片,后用实验组和对照组的血清和/或脑脊液分别孵育含海马结构的脑组织切片,观察实验组抗体作用结果;将表达NR1和NR2(A、B)的质粒以等分子浓度在合适条件下共转染至HEK293细胞,采用免疫荧光及Western Blotting的方法验证转染是否成功,然后用实验组和对照组的血清和/或脑脊液孵育表达NRl/NR2功能二聚体的HEK293细胞,采用免疫荧光方法观察是否存在抗原抗体反应,从而判断血清和/或脑脊液中是否存在抗NMDAR抗体;将该检测方法与国外已有的抗体检测方法对照,分析该检测方法的特异性和灵敏度.结果表明抗NMDAR脑炎患者血清和/或脑脊液中检测到抗NMDAR抗体对其诊断至关重要。抗NMDAR抗体主要作用于NRl/NR2功能二聚体，NRl胞外区是抗体结合的位点，HEK293细胞转染表达NMDAR亚基的方法是抗NMDAR脑炎临床检测的一种重要方法。

摘要： 目的：在卵巢癌COC1细胞中大量表达p53正向凋亡调控因子(PUMA),起到抑制COC1细胞的作用.方法：采用人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)转染卵巢癌COC1细胞,通过细胞活性检测试剂盒和凋亡试剂盒研究COC1细胞的生长情况,同时分析表达PUMA的含量.结果：转染Ad-hTERT-PUMA后，PUMA大量表达，抑制COC1细胞生长，促进细胞凋亡。结论：Ad-hTERT-PUMA成功转染卵巢癌COC1细胞并大量表达，起到了抑制卵巢癌细胞增长的作用。

摘要： 目的：在卵巢癌COC1细胞中大量表达p53正向凋亡调控因子(PUMA),起到抑制COC1细胞的作用.方法：采用人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)转染卵巢癌COC1细胞,通过细胞活性检测试剂盒和凋亡试剂盒研究COC1细胞的生长情况,同时分析表达PUMA的含量.结果：转染Ad-hTERT-PUMA后，PUMA大量表达，抑制COC1细胞生长，促进细胞凋亡。结论：Ad-hTERT-PUMA成功转染卵巢癌COC1细胞并大量表达，起到了抑制卵巢癌细胞增长的作用。

摘要： 目的：在卵巢癌COC1细胞中大量表达p53正向凋亡调控因子(PUMA),起到抑制COC1细胞的作用.方法：采用人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)转染卵巢癌COC1细胞,通过细胞活性检测试剂盒和凋亡试剂盒研究COC1细胞的生长情况,同时分析表达PUMA的含量.结果：转染Ad-hTERT-PUMA后，PUMA大量表达，抑制COC1细胞生长，促进细胞凋亡。结论：Ad-hTERT-PUMA成功转染卵巢癌COC1细胞并大量表达，起到了抑制卵巢癌细胞增长的作用。

摘要： 目的：在卵巢癌COC1细胞中大量表达p53正向凋亡调控因子(PUMA),起到抑制COC1细胞的作用.方法：采用人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)转染卵巢癌COC1细胞,通过细胞活性检测试剂盒和凋亡试剂盒研究COC1细胞的生长情况,同时分析表达PUMA的含量.结果：转染Ad-hTERT-PUMA后，PUMA大量表达，抑制COC1细胞生长，促进细胞凋亡。结论：Ad-hTERT-PUMA成功转染卵巢癌COC1细胞并大量表达，起到了抑制卵巢癌细胞增长的作用。

摘要： 目的：在卵巢癌COC1细胞中大量表达p53正向凋亡调控因子(PUMA),起到抑制COC1细胞的作用.方法：采用人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)转染卵巢癌COC1细胞,通过细胞活性检测试剂盒和凋亡试剂盒研究COC1细胞的生长情况,同时分析表达PUMA的含量.结果：转染Ad-hTERT-PUMA后，PUMA大量表达，抑制COC1细胞生长，促进细胞凋亡。结论：Ad-hTERT-PUMA成功转染卵巢癌COC1细胞并大量表达，起到了抑制卵巢癌细胞增长的作用。

摘要： 目的：在卵巢癌COC1细胞中大量表达p53正向凋亡调控因子(PUMA),起到抑制COC1细胞的作用.方法：采用人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)转染卵巢癌COC1细胞,通过细胞活性检测试剂盒和凋亡试剂盒研究COC1细胞的生长情况,同时分析表达PUMA的含量.结果：转染Ad-hTERT-PUMA后，PUMA大量表达，抑制COC1细胞生长，促进细胞凋亡。结论：Ad-hTERT-PUMA成功转染卵巢癌COC1细胞并大量表达，起到了抑制卵巢癌细胞增长的作用。

摘要： 目的：构建Livin shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的胰腺癌panc1细胞系.rn 方法：合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGCsilencerTM U6/Neo/GFP/RNAi质粒,通过测序进行鉴定.干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染pancl细胞.经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.定量RT-PCR检测所筛选克隆LivinmRNA的转录水平,western blot验证Livin蛋白表达水平改变.rn 结果：测序证明Livin干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒稳定转染的panc1细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光,定量RT-PCR和western blot检测结果显示Livin shRNA序列对胰腺癌细胞系LivinmRNA及蛋白表达均有抑制作用.rn 结论：成功构建了Livin shRNA真核表达载体,Livin shRNA质粒稳定转染的panc1细胞系的建立为进一步研究Livin在胰腺癌细胞中的作用奠定了实验基础.

摘要： 目的：构建Livin shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的胰腺癌panc1细胞系.rn 方法：合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGCsilencerTM U6/Neo/GFP/RNAi质粒,通过测序进行鉴定.干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染pancl细胞.经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.定量RT-PCR检测所筛选克隆LivinmRNA的转录水平,western blot验证Livin蛋白表达水平改变.rn 结果：测序证明Livin干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒稳定转染的panc1细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光,定量RT-PCR和western blot检测结果显示Livin shRNA序列对胰腺癌细胞系LivinmRNA及蛋白表达均有抑制作用.rn 结论：成功构建了Livin shRNA真核表达载体,Livin shRNA质粒稳定转染的panc1细胞系的建立为进一步研究Livin在胰腺癌细胞中的作用奠定了实验基础.

摘要： 目的：构建Livin shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的胰腺癌panc1细胞系.rn 方法：合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGCsilencerTM U6/Neo/GFP/RNAi质粒,通过测序进行鉴定.干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染pancl细胞.经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.定量RT-PCR检测所筛选克隆LivinmRNA的转录水平,western blot验证Livin蛋白表达水平改变.rn 结果：测序证明Livin干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒稳定转染的panc1细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光,定量RT-PCR和western blot检测结果显示Livin shRNA序列对胰腺癌细胞系LivinmRNA及蛋白表达均有抑制作用.rn 结论：成功构建了Livin shRNA真核表达载体,Livin shRNA质粒稳定转染的panc1细胞系的建立为进一步研究Livin在胰腺癌细胞中的作用奠定了实验基础.

摘要： 本发明提供了一种转染NK细胞的基因和转染载体，属于基因工程技术领域，将ICasp9基因、T2A基因、IL15基因、T2A基因、NGFR基因、T2A基因和目的基因顺次串联。将本发明提供的转染NK细胞的基因连接到pCMV载体中，得到转染NK细胞的载体，将所述载体转染NK细胞后再经过药物筛选和流式筛选，得到表达目的基因的NK细胞，表达目的基因的NK细胞可以同时表达开关结构，在诱导物添加时即可引起自杀反应，防止了表达IL‑15的NK细胞长期存在，也可以在915NGFR细胞出现副作用时进行干预。

摘要： 本发明提供了一种转染NK细胞的基因和转染载体，属于基因工程技术领域，将ICasp9基因、T2A基因、IL15基因、T2A基因、NGFR基因、T2A基因和目的基因顺次串联。将本发明提供的转染NK细胞的基因连接到pCMV载体中，得到转染NK细胞的载体，将所述载体转染NK细胞后再经过药物筛选和流式筛选，得到表达目的基因的NK细胞，表达目的基因的NK细胞可以同时表达开关结构，在诱导物添加时即可引起自杀反应，防止了表达IL‑15的NK细胞长期存在，也可以在915NGFR细胞出现副作用时进行干预。

摘要： 本申请属于细胞转染技术领域，具体涉及用于细胞转染的受体转染微泡、配体转染微泡以及两段制导式细胞转染方法。用于细胞转染的受体转染微泡是用微泡将经过人工受体修饰的脂质体包覆形成,配体转染微泡是用经人工配体修饰的脂质体将核酸包载形成，两段制导式细胞转染方法包括受体‑细胞结构形成步骤和多肽结合转染步骤。本申请通过模拟病毒通过膜融合的途径而非内吞的途径进行细胞转染，具有高效的转染效率以及低的致癌风险。

摘要： 本发明提供一种细胞转染装置、细胞转染方法及微流道制作方法，装置包括微流控芯片及可调谐挤压机构，微流控芯片内设有微流道，微流道内设有一受限空间，多个外源物质设于微流道内；可调谐挤压机构包括微针尖、压电致动器及悬臂梁；当压电致动器振动时，带动微针尖上下运动、挤压或脱离微流控芯片，带动受限空间内的细胞的细胞膜破坏产生通孔，外源物质通过通孔进入到细胞内。上述细胞转染装置、细胞转染方法及微流道制作方法，通过可调谐挤压机构规律性的挤压或脱离微流控芯片，使得微流道的宽度可变，从而适用于不同大小的细胞，解决了传统固定宽度的微流道只适用于特定大小或者变形力的细胞，对大分子的纳米外源物质的转染效率低下的问题。

摘要： 本申请属于细胞转染技术领域，具体涉及用于细胞转染的受体转染微泡、配体转染微泡以及两段制导式细胞转染方法。用于细胞转染的受体转染微泡是用微泡将经过人工受体修饰的脂质体包覆形成,配体转染微泡是用经人工配体修饰的脂质体将核酸包载形成，两段制导式细胞转染方法包括受体‑细胞结构形成步骤和多肽结合转染步骤。本申请通过模拟病毒通过膜融合的途径而非内吞的途径进行细胞转染，具有高效的转染效率以及低的致癌风险。

摘要： 本发明涉及细胞转染相关设备技术领域，其目的是提供一种用于细胞转染的冲击式振动装置及冲击式细胞转染方法，转染效率高、对细胞本身伤害低。上述用于细胞转染的冲击式振动装置包括框架、设置在所述框架内的活动平台及驱动所述活动平台在竖直方向上移动的电磁驱动件，所述活动平台上设置有细胞转染芯片组件；所述电磁驱动件包括上电磁铁，所述上电磁铁固设在所述框架上，所述活动平台设置于所述上电磁铁的下方。本发明解决了现有技术中的电转染和化学转染的转染效率低、对细胞本身伤害较大的问题。

摘要： 本发明公开了一种微流控离心式挤压的细胞转染系统及细胞转染方法，涉及生物转染技术领域，该细胞转染系统包括复合碟体，复合碟体包括层叠设置的第一碟体与第二碟体，第一碟体与第二碟体中的一个盖设于另一个表面，第二碟体盖设于第一碟体的上表面时，第一碟体在朝向第二碟体的一侧表面开设有至少一组转染空间，转染空间包括微流道及第一存储槽与第二存储槽，第一存储槽与第二存储槽分别设于第一碟体的近圆心端与远圆心端，微流道的两端分别连通于第一存储槽与第二存储槽，微流道内设有用于对细胞进行挤压的限位口。本发明能够解决现有技术下细胞转染系统中细胞获取到的动力源较少，影响了细胞转染效率的问题。

摘要： 本发明提供一种细胞转染装置、细胞转染方法及微流道制作方法，装置包括微流控芯片及可调谐挤压机构，微流控芯片内设有微流道，微流道内设有一受限空间，多个外源物质设于微流道内；可调谐挤压机构包括微针尖、压电致动器及悬臂梁；当压电致动器振动时，带动微针尖上下运动、挤压或脱离微流控芯片，带动受限空间内的细胞的细胞膜破坏产生通孔，外源物质通过通孔进入到细胞内。上述细胞转染装置、细胞转染方法及微流道制作方法，通过可调谐挤压机构规律性的挤压或脱离微流控芯片，使得微流道的宽度可变，从而适用于不同大小的细胞，解决了传统固定宽度的微流道只适用于特定大小或者变形力的细胞，对大分子的纳米外源物质的转染效率低下的问题。

摘要： 本发明提供了一种可以提高难转染干细胞转染效率的方法。我们之前的研究中发现一类骨髓间充质干细胞（BMSCs）之所以转染效率低主要是由于被摄入物质难以从它的囊泡中逃逸出来。我们提供了一种解决在BMSCs中囊泡逃逸难的问题的方法，进而提高BMSCs转染效率，可以被广泛应用于干细胞工程、蛋白质治疗和基因治疗等领域。

摘要： 本发明提供了一种HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法，涉及基因工程技术领域，所述试剂包括穿膜肽DLR8与脂质体混合物，试剂中穿膜肽DLR8：脂质体的质量比为4～8.8:1。所述HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法中，选择穿膜肽DLR8与脂质体混合物作为HEK293细胞瞬时表达的转染试剂，高糖DMEM培养基作为转染孵育Buffer，并在细胞转染处理后48h进行细胞悬浮，添加小分子添加剂丁酸钠，提高了HEK293细胞外源蛋白的表达水平，使得目的基因可高效表达。