改良非石蜡切片法荧光标记三维凝胶培养系统中形成的输卵管内膜干细胞团

摘要

目的:研究改良非切片技术对细胞团中的细胞进行定性荧光标记的方法可行性及效果.方法:将6～8周龄ICR雌鼠输卵管撕碎,用胶原蛋白酶消化20 min,将分散的输卵管混合细胞播种于三维凝胶培养系统中,培养6 d后,用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)及膜蛋白上皮特异性黏附分子(EpCAM)标记凝胶培养系统中形成的细胞团.结果:在非免疫荧光标记实验中,EdU插入到S期细胞的DNA中,并且被灵敏地检测出.免疫荧光标记实验中,用小鼠抗EpCAM标记细胞团.无论是免疫还是非免疫荧光标记,都可以得到很清晰的阳性结果.结论:改良后的非切片荧光标记法相较于传统的切片法更加方便、更加快捷.