自噬参与辣椒素对U251胶质瘤细胞凋亡的影响

摘要

目的:研究辣椒素对胶质瘤细胞的影响及其作用机制.方法:U251细胞常规培养,不同浓度的辣椒素作用于U251细胞,MTT法检测细胞存活率;然后将U251细胞分为正常对照组、辣椒素组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、辣椒素+3-MA组,免疫荧光显色检测Smac蛋白的表达,RT-PCR检测beclin 1和Smac的mRNA表达水平,免疫印迹检测procaspase-3蛋白的表达.结果:MTT结果显示,辣椒素浓度在100 μmol/L时,U251细胞的存活减少,之后再增加辣椒素的浓度,细胞的存活几乎不变.免疫荧光显色结果显示,在辣椒素+ 3-MA组中,Smac蛋白的表达与正常对照组、辣椒素组、3-MA组相比,其荧光强度显著增强.RT-PCR结果显示,在辣椒素+3-MA组中,beclin 1的mRNA表达与正常对照组、辣椒素组、3-MA组相比,其表达量显著降低,而Smac的mRNA表达量升高.免疫印迹结果显示,在辣椒素+ 3-MA组中,procaspase-3的表达与正常对照组、辣椒素组、3-MA组相比,其表达量显著降低.结论:辣椒素能够诱导胶质瘤U251细胞的凋亡.抑制自噬能够促进辣椒素的促凋亡作用,这种作用主要是通过促进Smac释放到细胞质中,从而激活caspase-3实现的.