球等鞭金藻生长抑制物的高效液相色谱分析

摘要

采用硅烷化键合相C18反相色谱柱,以V(乙腈): V(水)=63: 37为流动相,0.3 mL/min恒流洗脱,检测波长UV-235 nm等条件,建立了一种利用反相高效液相色谱分析球等鞭金藻生长抑制物的粗提物、SephadexG-15凝胶柱层析分离获得的3个组分、硅胶G薄层层析分离获得的4个组分等8个分离纯化产物中具有抑制活性组分的方法,并确定了具有抑制活性组分的保留时间.通过乙酸乙酯萃取球等鞭金藻老化培养液,得到了具有抑制活性的粗提物;粗提物经SephadexG-15 凝胶柱层析分离后,获得3个具有抑制活性的组分;通过硅胶G薄层层析对此3个组分进行分离,在获得的4个组分中,仅有一个组分具有抑制活性.将粗提物与SephadexG-15凝胶柱层析分离获得组分的高效液相色谱进行对比,确定具有抑制活性组分的保留时间在3.827～6.002 min范围内;通过与硅胶G薄层层析分离获得组分的高效液相色谱的再次对比,发现仅具有抑制活性的组分Ⅱ(Rf为0.637)中出现保留时间为4.875 min的峰,并且相同保留时间的峰同样出现在具有抑制活性的粗提物以及SephadexG-15凝胶柱层析分离获得的3个组分的高效液相色谱中.结果表明:在优化的实验条件下,高效液相色谱中保留时间为(4.872±0.005) min的峰对应的组分正是具有抑制活性的组分.