巴豆生物碱抑制卵巢癌细胞增殖和诱导其凋亡的实验研究

摘要

目的 了解巴豆生物碱诱导人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期、凋亡效果,以及凋亡与增殖细胞核抗原(PCNA)表达之间的关系.方法 将浓度分别为50、100和150 μg/ml的巴豆生物碱作用于人卵巢癌细胞HO-8910细胞后,采用流式细胞术检测巴豆生物碱对人卵巢癌细胞HO-8910细胞的增殖抑制作用和诱导细胞凋亡;采用倒置显微镜及免疫组织化学法对凋亡调节基因PCNA表达进行检测.结果 巴豆生物碱作用48 h后,倒置显微镜下可见细胞皱缩、出芽及少量凋亡小体形成.应用不同剂量的巴豆生物碱(50～150 μg/ml)分别作用于 HO-8910 细胞 24、48、72 h后,巴豆生物碱抑制了HO-8910细胞增殖,并呈现剂量、时间依赖性.随着巴豆生物碱的作用时间延长,G0/G1期细胞比例明显下降,而较多的细胞阻滞于G2/M期.巴豆生物碱的作用浓度从50 μg/ml增至150 μg/ml,则平均细胞凋亡率从2.13%上升为21.89%.结论 巴豆生物碱可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞G2/M 期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡.由于PCNA在G1～S期进程过度中起着重要作用,PCNA 表达的下调也导致细胞周期进程被阻抑.巴豆生物碱作用24 h,随浓度的升高,PCNA阳性细胞百分率逐渐降低.