和厚朴酚对组织因子途径抑制物-2诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

摘要

目的 探讨和厚朴酚对组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)表达的影响,以及和厚朴酚和TFPI-2过表达对人胶质瘤U251细胞凋亡的影响.方法 体外培养胶质瘤U87、U251、LN18、LN229、A172细胞系,荧光定量PCR(QPCR)检测不同细胞系中TFPI-2的表达.不同浓度(0、10、20、30、40和50 μmol/L)和厚朴酚干预U251细胞,QPCR和Western blotting检测TFPI-2 mRNA和蛋白的表达.采用腺病毒载体pGSadeno-TFPI-2过表达U251细胞内TFPI-2的表达,流式细胞术及caspase-3试剂盒检测细胞凋亡率和caspase-3活性.结果 在选取的5种不同胶质瘤细胞株中,U251和A172细胞内TFPI-2 mRNA明显下降(P＜0.05).和厚朴酚呈浓度依赖性增加U251细胞内TFPI-2 mRNA水平;其中50 μmol/L和厚朴酚干预24h后,TFPI-2 mRNA表达水平升高最明显(P＜0.05).腺病毒感染U251细胞后TFPI-2表达水平明显增加(P＜0.05).过表达TFPI-2和50 μnol/L和厚朴酚干预均可增加U251细胞凋亡水平和caspase-3的活性(P＜0.05).结论 和厚朴酚处理可增加U251细胞内TFPI-2的表达;和厚朴酚联合TFPI-2过表达显著诱导胶质瘤细胞凋亡.