MALDI和ESI质谱鉴定肿瘤相关糖蛋白的N-糖链结构

摘要

N-糖基化是一种与疾病密切相关的蛋白翻译后修饰.为了建立糖蛋白的N-糖链结构分析方法,以唾液酸糖肽（SGP）为模式分子进行方法优化,再以人绒毛膜促性腺激素（hCG）为对象,经变性处理后用PNGase F酶解释放N-糖链,将酶解液用多孔石墨化碳小柱进行固相萃取,经纯化富集得到N-糖链后,再分别采用基质辅助激光解吸电离（matrix-assisted laser description ionization,MALDI）和电喷雾电离（electrospray ionization,ESI）两种方式对hCG的N-糖链进行结构分析.结果表明,经过质谱分析共鉴定到17种N-糖链,其中二天线的7种,三天线的5种,四天线的5种.在众多糖型中二天线糖链含量最多.MALDIMS主要得到单电荷峰,ESI-MS以带2个电荷的为主.利用MALDI-MS和ESI-MS技术可快速分析蛋白的N-糖链的结构,为进一步寻找肿瘤糖链标志物及肿瘤的早期预防诊断提供技术支持.