王不留行炮制前后的UPLC指纹图谱比较及刺桐碱和王不留行黄酮苷的含量测定Δ

摘要

目的:比较王不留行炮制(清炒)前后的指纹图谱差异,并测定其炒制前后刺桐碱、王不留行黄酮苷的含量.方法:采用超高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱为YMC Trait C18,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.35 mL/min,检测波长为219 nm,柱温为35℃,进样量为1μL.以王不留行黄酮苷为参照,绘制王不留行生品及其炮制品(各17批,编号分别为S1～S17、CS18～CS34)的指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价及共有峰指认;采用SPSS 20.0软件进行聚类分析、主成分分析和因子分析.采用上述UPLC法测定王不留行生品及其炮制品中刺桐碱、王不留行黄酮苷的含量.结果:17批王不留行生品及其炮制品的UPLC指纹图谱中均有共有峰5个,相似度均大于0.99;共指认了刺桐碱和王不留行黄酮苷等2个共有峰.聚类分析结果显示,S1～S17聚为一类,CS18～CS34聚为一类;主成分分析及因子分析结果显示,第1主成分的方差贡献率为76.418％,刺桐碱、王不留行黄酮苷在第1主成分上有较高载荷(特征值分别为0.976、0.966).刺桐碱、王不留行黄酮苷检测质量浓度的线性范围分别为6.437～321.832、7.729～386.437μg/mL(r均大于0.999);检测限、定量限分别为0.085、0.284 ng(生品)和0.739、2.465 ng(炮制品);精密度、重复性、稳定性(12 h)、耐用性试验的RSD均小于3％(n=6或n=5);平均加样回收率分别为96.42％(RSD=0.85％,n=6)、99.13％(RSD=1.74％,n=6).两种成分的含量分别为0.11％～0.20％、0.42％～0.63％(生品)和0.08％～0.11％、0.34％～0.50％(炮制品).结论:成功建立了王不留行生品及其炮制品的UPLC指纹图谱.王不留行炒制前后的化学成分虽一致性较好,但炒制后刺桐碱、王不留行黄酮苷的含量均有所降低.