LC-MS/MS法测定全血中他克莫司浓度的方法学研究

摘要

目的:建立测定人全血中他克莫司液相色谱.串联质谱联用(LC-MS/MS)方法,并与微粒子免疫分析(MEIA)方法测定的结果进行了比较.方法:运用LC-MS/MS方法,血样经乙腈沉淀蛋白,上清液氮气吹干流动相复溶进样.色谱柱:ZorbaxExtend-C柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-乙腈-20 mmol·L-1醋酸胺溶液(80:15:5);流速:0.4 ml·min-1.采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应检测方式测定样品的浓度.检测离子对分别为m/z 821.7→m/z 768.4和m/z 821.7→m/z 786.5.结果:他克莫司在0.5～128 ng·ml-1浓度范围内,峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999 1,n=5),最低定量限为0.5 ng·ml-1,平均回收率为99.0%,日内精密度、日间精密度的RSD分别为3.38%和4.16%.MEIA分析采用标准IMX测定方法.两种方法比较,其标准差小于3.0,表明相关性好.结论:本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性,可用于他克莫司血药浓度监测和人体药药动力学研究.