LC-MS/MS法同时测定人全血中四种免疫抑制剂类药物浓度

摘要

目的：建立LC-MS/MS法同时测定人全血中环孢素A、依维莫司、他克莫司和西罗莫司的浓度。方法：人全血样品用乙腈沉淀蛋白后,上清液用叔丁基甲醚提取后选用ZORBAX SB C18（2.1 mm×100 mm,3.5μm）色谱柱,流动相采用甲醇-10 mmol/L乙酸铵溶液（均含0.1%甲酸）梯度洗脱,采用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 1 202.6→m/z 425.1（环孢素A）、m/z 975.8→m/z 908.6（依维莫司）、m/z 821.6→m/z 768.5（他克莫司）、m/z 9 31.8→m/z 864.2（西罗莫司）和m/z 366.2→m/z 132.0（内标吲达帕胺）。结果：全血中环孢素A的线性范围为10~2 000 ng/m L（r=0.996 2）,定量下限为10 ng/m L,依维莫司、他克莫司和西罗莫司的线性范围为0.50~100 ng/m L（r〉0.99）,定量下限为0.50 ng/m L;四种药物的平均回收率95.1%~110.6%;日内、日间RSD均小于15%;提取回收率在78.6%~85.9%之间。结论：该方法快速、灵敏、准确,专属性强,重复性好,适用于人全血中同时测定环孢素A、依维莫司、他克莫司和西罗莫司浓度。