抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠Smad3及其相关miRNAs的影响

摘要

目的 探讨抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠Smad3,miR-23-3p,miR-145-5p表达的影响.方法 将90只Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、卡托普利组(C组)、抗纤益心方低剂量组(D组)、抗纤益心方中剂量组(E组)和抗纤益心方高剂量组(F组).A组大鼠常规饲养,其余各组大鼠制备扩张型心肌病大鼠模型;制模成功后,B组每日灌胃卡托普利10.125 mg/kg,D组、E组、F组每日分别灌胃抗纤益心方4.7,9.4,18.8 mg/kg.药物干预8周后,检测大鼠心功能,取腹腔主动脉血,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法测定miR-23-3p和miR-145-5p的表达水平;取心肌组织,采用蛋白质印迹(WB)法测定Smad3蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测匀浆液转化生长因子β(TGF-β)、基质金属酶-1(MMP-1)及基质金属酶-1抑制剂(TIMP-1)蛋白水平.结果 与A组相比,B组大鼠的左室收缩末压(LVESP)和左心室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)明显下降,左室舒张末压(LVEDP)明显上升;与B组相比,C组、D组、E组、F组大鼠的LVESP和±dP/dtmax上升,LVEDP下降;与D组相比,E组和F组大鼠的LVESP和±dP/dtmax上升,LVEDP下降,差异均有统计学意义(P<0.05).与A组相比,B组大鼠的心肌Smad3表达水平明显升高,循环miR-23-3p,miR-145-5p表达水平明显降低;与B组相比,C组、D组、E组、F组大鼠的心肌Smad3表达水平均明显降低,循环miR-23-3p,miR-145-5p表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与D组相比,E组和F组大鼠的循环miR-23-3p和miR-145-5p表达依次升高,Smad3表达依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05),表明心肌Smad3表达水平与循环miR-23-3p,miR-145-5p表达水平呈负相关性(P<0.05).与A组相比,B组大鼠的TGF-β和MMP-1表达水平明显升高,TIMP-1表达水平明显降低(P<0.01);与B组相比,C组、D组、E组、F组大鼠的TGF-β和MMP-1表达水平明显降低,TIMP-1表达水平明显升高;与D组相比,E组和F组大鼠的TGF-β和MMP-1水平均依次降低,TIMP-1水平依次升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 抗纤益心方可上调扩张型心肌病大鼠miR-23-3p,miR-145-5p表达,下调Smad3表达,进而影响TGF-β/Smad3通路的功能,可能为其改善心室重构的作用机制之一.