人肺腺癌细胞系SPC-A1多西他赛耐药细胞系的建立及其特性

摘要

背景与目的:多西他赛是近年来应用于临床的一种有效的化疗药物,其独特的作用机制使其具有良好的应用前景,然而,耐药性影响了其临床应用.本研究拟通过体外诱导耐药建立肺癌SPC-A1的多西他赛耐药细胞系,以便于进一步研究其耐药机制及耐药逆转.方法:通过体外逐步增加多西他赛浓度的方法诱导建立肺癌SPC-A1的多西他赛耐药细胞系.MTY比色法检测该耐药细胞的多药耐药特性;流式细胞术检测其细胞周期和细胞内罗丹明蓄积;细胞计数法绘制细胞生长曲线,计算倍增时间;染色体核型分析对比耐药和亲本细胞株在遗传学上的变化.结果:MTY显示SPC-A1/Docetaxel对多西他赛、紫杉醇、顺铂、卡铂、吉西他滨、长春瑞滨、表柔比星、依托泊苷的耐药指数分别为13.20、2.18、1.12、1.39、1.38、0.93、10.14、2.12.流式细胞术检测其细胞周期显示:与亲代细胞比较SPC-A1/Docetaxel处于G1期的细胞增加,S期的细胞减少,G2期的细胞无明显变化.流式细胞仪检测SPC-A1和SPC-A1/Docetaxel细胞内罗丹明蓄积荧光强度分别为1382.26±0.32和806.34±0.49,耐药细胞内罗丹明蓄积较亲本细胞明显减少.SPC-A1和SPC-A1/Docetaxel细胞的倍增时间分别为27.4、35.1 h.染色体核型分析两者遗传学无明显变化.结论:经体外诱导耐药建立的SPC-A1/Docetaxel表现出对多西他赛较高的耐药性,并呈多药耐药特性,耐药细胞系SPC-A1/Docetaxel与亲本细胞SPC-A1的生物学特性有明显差异,可用于对多西他赛的耐药机制和逆转耐药研究.