人肺腺癌Anip973/CDDP耐药细胞系的建立及生物学特性分析

摘要

目的：建立人肺腺癌耐药细胞模型Anip973/CDDP并检测其生物学特性。 方法：本研究应用人肺腺癌细胞系Anip973，采用顺铂逐步增加剂量法，诱导建立人肺腺癌耐药细胞模型Anip973/CDDP。细胞计数法绘制生长曲线，计算其倍增时间；光学显微镜和扫描电镜观察其形态；流式细胞仪分析其细胞周期；MTT法测定细胞IC50，计算其耐药指数。 结果：本研究经过24个月建立了人肺腺癌耐药细胞系Anip973/CDDP；通过Anip973/CDDP生物学特性分析发现：(1)光镜及电子显微镜观察，Anip973/CDDP细胞与Anip973细胞比较细胞形态不规则，呈长伪足的多角形及体积增大；胞质内细胞器比较发达，线粒体丰富；(2)与亲代细胞相比Anip973/CDDP细胞生长曲线的倍增时间无明显差异；(3)细胞周期分析发现：耐药细胞系Anip973/CDDP的G0-G1期细胞明显减少，为52.18％，S期细胞明显增多，为28.60％；而亲代细胞系Anip973的上述各周期的百分比分别为66.11％和16.37％(p<0.05)，两种细胞系G2-M期细胞无明显变化，提示耐药细胞的DNA合成增加；⑷经MTT法测定Anip973/CDDP细胞比较亲代细胞的CDDP半数致死浓度（IC50）增大至27.26倍，该耐药细胞系同时对伊立替康、吉西他滨、达卡巴嗪、足叶乙甙、诺维本、表阿霉素药物也产生了交叉耐药，耐药倍数分别为20.33、19.96、7.10、5.34、5.27、4.38，而对异环磷酰胺、氟尿嘧啶相对敏感，耐药倍数分别为1.25、1.09（均P＜0.05）。 结论：Ainp973/CDDP是可靠的人肺腺癌耐药细胞系，它的建立为进一步探讨顺铂致人NSCLC MDR的发生机制奠定了基础。