游离脂肪酸诱导肾小管上皮细胞凋亡的实验研究

摘要

目的 探讨游离脂肪酸(FFAs)对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)的凋亡作用及凋亡机制.方法 用含有不同浓度(0、125、250、500 μM)软脂酸的DMEM-F12培养肾小管上皮细胞(NRK-52E),在24h、48h两个时段以原位末端标记(TUNEL法)检测细胞凋亡率,用硝酸还原酶法测定以上各组培养液中一氧化氮(NO)水平.在48h时段用免疫细胞化学法检测caspase-3表达水平.结果随着软脂酸浓度的增高、作用时间的延长:①NRK-52E细胞的凋亡率逐渐增高,24h时三个软脂酸组按软脂酸浓度由低到高的凋亡率依次为(9.7±1.9)%、(14.2±4.5)%、(23.4±5.3)%,48h时为(16.2±3.7)%、(24.8±4.4)%、(35.4±5.7)%,与对照组相比均有统计学意义(P<0.05);②在凋亡率增高组的培养液中测得NO浓度也增加,差异均有显著性(P<0.05).③48h时各软脂酸干预组caspase-3阳性表达率增高,与对照组相比均有统计学差异(P<0.05).结论 游离脂肪酸具有促进肾小管上皮细胞凋亡的作用,而这种作用与其自身在FFAs作用下产生过多的NO使caspase-3高表达有关.