对人结肠癌细胞株HT-29转染shRNA重组质粒后Survivin基因变化的研究

摘要

目的 通过对人结肠癌细胞株HT-29转染shRNA重组质粒后观察Survivin基因的变化.方法 设计两条针对Survivin基因CDS区不同位点的siRNA片段并构建shRNA表达载体,重组质粒使用阳离子脂质体法转染结肠癌细胞株HT-29.RT-PCR,Western -blot检测转染后mRNA及蛋白表达.结果 转染shRNA重组质粒可有效抑制HT-29细胞Survivin的表达,Survivin mRNA和蛋白表达下调,表明Survivin基因沉默效果较高;两个转染组之间相比pshRNA1组Survivin基因的表达量低于pshRNA2组.结论 人结肠癌细胞株中的Survivin基因表达率可通过shRNA重组质粒转染而发生变化;siRNA1和siRNA2序列中Survivin基因表达量存在统计学意义,提示我们在今后有关Survivin基因靶向治疗研究中是否需要考虑到序列的选择以提高作用效果.