人肝再生增强因子融合蛋白表达载体的构建

摘要

目的:克隆人肝再生增强因子的cDNA并构建谷胱甘肽巯基转移酶-人肝再生增强因子(GST-hALR)融合蛋白表达载体.方法:根据人肝再生增强因子核苷酸序列,从人胎肝cDNA文库中扩增到hALRcDNA,亚克隆于pUC18载体,核苷酸序列测定证实为hALR;将hALRcDNA亚克隆于pGEX-4T质粒,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆酶切鉴定.结果:重组阳性克隆经酶切鉴定证实重组片段已正确插入相应酶切位点,片段与PCR扩增片段大小相同,碱基序列正确.结论:GST-hALR融合蛋白表达载体的成功构建,为获得较大量基因工程hALR产品用于重症肝炎治疗打下基础.