人肝再生增强因子基因的克隆和真核表达载体的构建

摘要

从6月龄流产的胎儿肝脏中提取总RNA,利用反转录-PCR(RT-PCR)技术扩增出人肝细胞再生增强因子hALR(Human augmenter of liver regeneration)基因片段,克隆于PET28a(+)载体,经进一步PCR及酶切鉴定,确定为此目的片段后进行序列分析,再将目的片段亚克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切方法鉴定重组子.采用RT-PCR技术成功地获得了hALR基因片段.序列分析表明,克隆的hALR基因与Genbank报道的人ALR核苷酸序列基本一致.完成了真核表达载体的构建,为hALR基因的真核表达奠定了基础.