丹参对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗NF-kB活性的影响

摘要

目的 研究丹参(salvia miltiorrhiza,SM)对庆大霉素(gentamicin,GM)耳中毒豚鼠耳蜗核因子-kB(nucleal factor-kappa B,NF-kB)活性的影响,探讨SM对GM耳毒性损伤的防护作用及其分子机制.方法 豚鼠随机分成正常对照组、GM组、GM+SM组和SM组,应用免疫组织化学SP法检测耳蜗组织中NF-kBP65和P50的活性;同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试,观察用药前后豚鼠听阈的变化.结果 GM组ABR阈值比用药前明显提高,与正常对照组比较,差异有显著性,并且高于GM+SM组.各组NF-kB P65阳性免疫反应仅见于耳蜗螺旋韧带,而其他部位均呈阴性.GM组、GM+SM组及SM组耳蜗P65阳性免疫反应的分布和正常对照组相同,反应活性与正常对照组比较差异无显著性.各组NF-kB p50阳性免疫反应见于耳蜗螺旋神经节、神经纤维、螺旋韧带、血管纹、骨螺旋板缘及螺旋器.GM组耳蜗螺旋韧带和血管纹的NF-kB P50活性较正常对照组明显增强;而同时给予SM的豚鼠,其耳蜗螺旋韧带和血管纹的NF-kB P50活性较GM组则明显减弱.正常对照组和SM组耳蜗外毛细胞胞浆可见P50阳性染色,胞核则未见染色.给予GM后,耳蜗外毛细胞胞核可见P50阳性染色,而联合应用SM后,外毛细胞核染色消失,在阴性对照切片上未见NF-kB P50阳性染色.通过直线相关检验证明豚鼠耳蜗螺旋韧带和血管纹NF-kB P50免疫反应的平均灰度值和ABK阈值二者呈负相关.结论 正常豚鼠耳蜗中有NF-kB P65和P50的表达.注射GM后,NF-kB被诱导激活,进而造成听力损害.SM通过显著抑制GM所致NF-kB的高活性,从而有效拮抗GM的耳毒性,这可能是丹参发挥防护作用的分子机制之一.