白蛋白纳米-超声微泡载组织型纤溶酶原激活物基因靶向体系制备和转染方法

摘要

目的 观察构建的白蛋白纳米组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因质粒超声微泡栽体的体内转染效果.方法 选择兔为实验对象,构建高表达tPA基因质粒;以白蛋白为原料制备栽tPA基因质粒纳米粒;用蔗糖和白蛋白制备糖蛋白超声微泡并与栽tPA基因质粒纳米粒进行交联形成靶向超声微泡转基因栽体.免疫组织化学法检测心脏、肝脏、腿部骨骼肌和肋骨组织的靶向转染及tPA的有效表达,同时用ELISA法检测血tPA含量和D一二聚体含量.结果 构建的白蛋白纳米tPA基因质粒超声微泡栽体系统超声靶向转染心脏、肝脏、骨骼肌和肋骨组织后可见有效tPA表达,同时伴有血tPA和D-二聚体含量增高和tPA功能增强,两者从术前的(0.20+0.05)μg/L和(81.76±9.84)μg/L增高至术后4周的(0.44±0.05)μg/L和(669.28±97.74)μg/L.结论 成功建立了白蛋白纳来tPA基因质粒超声微泡栽体系统,为纳米靶向转基因提供了理论和实验方法.