聚合酶链反应检测乳酸菌酪氨酸脱羧酶基因

摘要

酪氨酸脱羧酶与乳酸菌发酵食品中酪胺的产生密切相关.根据从 GenBank中检索到的酪氨酸脱羧酶基因序列设计一对特异性引物,采用 PCR技术对乳酸菌的基因组 DNA片段进行扩增 ,以此建立以酪氨酸脱羧酶基因为靶的产酪胺乳酸菌的分子生物学检测方法.结果表明,供试 12株乳酸菌中有 9株菌扩增出 1133bp DNA片段.对其中 3株菌的扩增产物进行 DNA序列测定,测序结果采用国际互联网上 NCBI的 BLAST工具进行同源性检索分析,发现它与已知的 Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Carnobacterium divergens的酪氨酸脱羧酶基因序列均高度同源,其中 PLP( 5'-磷酸吡哆醛)的结合位点高度保守,证明该扩增产物是酪氨酸脱羧酶的基因片段.应用该法与常规平板检测法比较显示,二者检测结果基本一致,表明本研究建立的 PCR方法可作为一种快速、高度特异的检测产酪胺乳酸菌菌株的新方法.