氨基甲酸乙酯降解酶的基因克隆

摘要

提取氨基甲酸乙酯降解菌株基因组DNA,以27f和1492r为引物PCR扩增并测定目的菌株16Sr DNA序列,基因组DNA以MboI进行酶切,与BamHI酶切的pUC18连接形成重组载体,将载体转化入大肠杆菌BL21中,构建基因组文库.利用溴麝香草酚蓝筛选培养基上筛选含有氨基甲酸乙酯降解酶基因的重组菌.通过本实验,鉴定出氨基甲酸乙酯降解酶菌株属于蜡样芽孢杆菌.阳性重组菌株可通过含有1％溴麝香草酚蓝的培养基(pH=6.5)筛选出来.