海藻糖合成酶产生菌筛选、鉴定及其产酶特性

摘要

以麦芽糖为唯一碳源高盐培养基,经高温培养,从温泉水样及其附近土壤中筛选得到一株菌株T2,经过生物合成途径初步验证,该菌株产海藻糖合酶,能够通过海藻糖合成酶(TreS)途径将麦芽糖转化为海藻糖.菌株T2为革兰氏阳性菌,杆状,有芽孢,经过生物学鉴定,将其初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.).对其产海藻糖合酶的酶学性质进行了研究:酶反应最适作用温度为60℃,在60℃条件下保温100 min仍能保持酶活性80.7％;最适作用pH值为7.0,在pH 6.0～7.5范围内稳定.采用正交试验对其发酵培养基配方进行了优化研究,确定了最佳的培养基组成为牛肉膏3.0 g/L,麦芽糖20.0 g/L,蛋白胨7.5 g/L,无机盐(K2HPO4+NaH2PO4+MgSO4·7H2O) 3.0 g/L.在此条件下,菌株T2产海藻糖合酶酶活力达到310.6 U/L.