马卵母细胞胞质内精子注射后体外发育能力的研究

摘要

本研究在非繁殖季节评估卵丘形态(松散型、致密型)、成熟培养体系(TCM 199、NCSU 23)、体外成熟时间(34、38h)和离子霉素结合6-DMAP激活对马卵母细胞胞质内精子注射(ICSI)后体外发育能力的影响.从屠宰场采集马卵巢,获得的卵母细胞进行体外成熟,然后注射马冷冻解冻精液,统计分裂情况.试验结果表明,①马松散型卵母细胞成熟率显著高于致密型卵母细胞(P＜0.05),分别为61.09%和41.24%,但ICSI后36 h分裂率无显著差异(P＞0.05),分别为47.34%和44.92%;②两种培养体系对马松散型或致密型卵母细胞成熟率及ICSI后36 h分裂率无显著影响(P＞0.05),但相同成熟体系培养松散型卵母细胞成熟率均显著高于致密型卵母细胞(P＜0.05),然而ICSI后36 h分裂率差异不显著(P＞0.05);③松散型或致密型卵母细胞在TCM 199或NCSU 23中成熟38 h成熟率均高于34 h成熟率,分别为44.43%～68.87%和34.52%～58.90%,松散型卵母细胞在TCM 199体系中成熟34 h、ICSI后激活组或对照组的分裂率显著高于成熟38 h、ICSI后激活组的分裂率(P＜0.05),以及致密型卵母细胞在TCM 199体系中成熟34 h、ICSI后激活组的分裂率(P＜0.05),而且显著高于松散型卵母细胞在NCSU 23体系中成熟38 h、ICSI后对照组的分裂率(P＜0.05);④ICSI后用离子霉素结合6-DMAP激活对马卵母细胞ICSI后36 h分裂无显著影响(P＞0.05).因此,马松散型和致密型卵母细胞的成熟能力存在差异,TCM199和NCSU 23成熟体系对这2种类型卵母细胞的发育能力无显著影响(P＞0.05).马卵母细胞成熟38 h成熟率高于34 h成熟率,TCM 199成熟体系培养松散型卵母细胞34 h进行ICSI后的分裂率最高.离子霉素结合6-DMAP激活对TCM 199或NCSU 23体系成熟马卵母细胞.ICSI后的体外发育能力无显著影响(P＞0.05).