利用SUMO表达系统高效表达猪O型口蹄疫病毒VP0、VP1、VP3基因

摘要

根据GenBank中公布的猪O型口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)全基因合成了FMDV结构蛋白前体蛋白P1基因,同时设计了扩增FMDV结构蛋白VP0、VP1和VP3基因的引物.以P1基因为模板,分别经PCR扩增获得FMDV VP0、VP1和VP3基因.扩增产物克隆于Blunt载体中,酶切后将目的片段连接到原核表达载体SUMO中,构建重组表达质粒SUMO-VP0、SUMO-VP1和SUMO-VP3,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3) plysS进行诱导表达.经SDSPAGE电泳可见融合蛋白均获得高效表达,融合蛋白表观分子质量分别约为55、48和40 ku.在IPTG浓度为1.0 mmol/L,温度为37℃,诱导5h时融合蛋白表达量最大.Western blotting结果表明,融合蛋白均可被FMDV阳性血清识别,反应原性良好.