高效液相色谱法测定灵芝二维甲硫氨酸胶囊溶出度及测量不确定度评定

摘要

建立高效液相色谱法测定灵芝二维甲硫氨酸胶囊的溶出度,并采用Top-down方法对甲硫氨酸、维生素B1、维生素B2的溶出度测定结果进行不确定度评定.采用高效液相色谱法,用Waters Atlantis T3或Thermo syncronis aQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,流动相A为水-1.0 mol/L甲酸铵-甲酸(990:10:1),流动相B为甲醇-1.0 mol/L甲酸铵-甲酸(990:10:1),进行梯度洗脱,流动相流量为1.0 mL/min,检测波长分别为:甲硫氨酸212 nm,维生素B1、维生素B2260 nm.溶出度实验采用桨法,以900 mL 0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质,搅拌转速为75 r/min.甲硫氨酸在0.01038～0.05192 mg/mL,维生素B1在1.113～5.563μg/mL,维生素B2在0.6000～3.000μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为1.0000、1.0000、0.9999.甲硫氨酸、维生素B1、维生素B2平均回收率分别为101.5％、99.4％、99.5％,测定结果的相对标准偏差分别为0.8％,0.4％和0.9％(n=9).采用Top-down方法,结合中间精密度、重复性及加标回收试验结果,对各组分溶出度测定结果进行不确定度评定,灵芝二维甲硫氨酸胶囊中甲硫氨酸、维生素B1、维生素B2的溶出度测定值的相对扩展不确定度分别为2.7％、1.9％、2.0％(k=2).