牦牛Prdm9基因保守区的原核表达及多克隆抗体制备

摘要

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从牦牛睾丸组织获得Prdm9基因的eDNA的保守区序列,克隆到pMD19-T载体中.经测序确证后,将基因克隆到原核表达载体PET32a(+),转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达.利用Ni柱亲和层析纯化蛋白,将得到的抗原免疫日本大白兔,获得了1:4效价的牦牛PRDM9保守序列的多克隆抗体,可用于后续试验的研究.