过表达脾酪氨酸激酶降低氧化应激诱导的小鼠成骨细胞凋亡

摘要

目的 探究脾酪氨酸激酶(SYK)对氧化应激(OS)诱导的小鼠成骨细胞MC3T3-1凋亡的影响及其机制.方法 过氧化氢(H2 O2)孵育MC3T3-1细胞,建立OS模型;实时荧光定量PCR检测SYK的mRNA表达量;Western blot检测SYK、AKT、p-AKT和UCP2蛋白表达量;构建重组质粒pcDNA.3.1-SYK或pcDNA.3.1-UCP2,分别转染MC3T3-1;AKT抑制剂HIMO抑制AKT磷酸化;annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡;caspase-3荧光检测等试剂盒检测caspase-3活性和ROS水平.结果 OS降低MC3T3-1中SYK的表达(P<0.01);过表达SYK降低OS诱导的细胞凋亡(P<0.05)、caspase-3活性(P<0.01)和ROS水平(P<0.01);过表达SYK提高AKT的磷酸化水平(P<0.05)和UCP2的表达量(P<0.01);抑制AKT磷酸化后可消除过表达SYK对细胞凋亡和UCP2的表达的影响(P<0.01).在过表达SYK、抑制AKT的MC3T3-1细胞中,过表达UCP2,细胞凋亡(P<0.05)和ROS水平(P<0.01)均显著降低.结论 过表达SYK可通过调控AKT/UCP2降低OS对小鼠成骨细胞的伤害.