观察大鼠下丘脑NPY神经元的培养及瘦素对其mRNA表达的影响

摘要

目的观察大鼠下丘脑NPY神经元的培养及瘦素对其mRNA表达的影响.方法用无血清限定性培养基体外培养新生大鼠的下丘脑神经元,观察其生长状况;用NSE、NF、NPY抗血清检测神经元的鉴定和表达,并对三者阳性细胞的胞体和突起做统计学分析.给予Leptin 10-10mol/L、10-8 mol/L 、10-6 mol/L 3个浓度,观察leptin对NPYmRNA表达的影响.结果培养的NSE和NF阳性细胞生长至第7天时均达高峰;NPY阳性神经元在培养7～10d时,亦处于一稳定时期.NPY mRNA的表达在给予Leptin 10-10mol/L时,与对照组相比无显著性差异;10-8 mol/L、 10-6 mol/L浓度时,表达增强,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05).结论取材于新生大鼠的下丘脑亦可进行体外培养;培养一周时是研究单因素影响神经元的最佳实验时间;在离体环境下,高浓度的leptin(10-8 mol/L 、10-6 mol/L)能促进NPYmRNA的表达,NPY可能表现为抑制GnRH分泌的作用.