华游蛇PLIγ模拟肽的设计与活性验证

摘要

目的 设计华游蛇血清PLIγ模拟肽并研究其对PLA2抑制作用.方法 用RT-PCR方法克隆华游蛇PLIγ基因并测序进行序列比对.基于华游蛇PLIγ序列设计一个长度为19个氨基酸的多肽.利用Auto dock分子对接分析该19肽与sPLA2相互作用,运用琼脂糖平板法验证其对sPLA2的抑制效果,并通过小鼠实验进一步检测其抗sPLA2出血毒性.利用LPS诱导小鼠Raw264.7细胞炎性反应,检测细胞花生四烯酸含量以评价19肽对细胞sPLA2酶活性抑制作用.结果 设计得到的华游蛇PLIγ模拟肽序列为PGLPLSYPNGGGGSVAFRS.该19肽较好地抑制蛇毒PLA2酶活性和出血毒性,并可以显著减少LPS诱导Raw264.7炎性细胞中花生四烯酸含量,IC50为86.3μmol/L.结论 本文设计的华游蛇PLIγ模拟肽,具备了天然PLIγ的活性,具有抗细胞炎性反应和蛇毒出血毒作用.