微小RNA-671-5p对人结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘要

目的探讨miR 671 5p对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法培养人正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞SW480、SW620、HT29和LOVO,实时荧光定量PCR(RT qPCR)检测miR 671 5p和染色盒同源物4(CBX4)mRNA水平。转染miR 671 5p mimics(miR 671 5p组)、阴性对照(miR NC组)至SW480细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,克隆实验检测细胞克隆形成能力,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法(Western Blot)检测CBX4、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶9(MMP 9)、基质金属蛋白酶14(MMP 14)及酪氨酸激酶1/信号转导子与转录激活子3(JAK1/STAT3)信号通路相关蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR 671 5p和CBX4之间靶向关系。结果与NCM460细胞比,结肠癌细胞SW480、SW620、HT29和LOVO中miR 671 5p水平显著降低(P<0.05),CBX4 mRNA水平显著升高(P<0.05)。与miR NC组比,miR 671 5p组SW480细胞培养24、48、72 h后的OD值、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数及CyclinD1、MMP 9、MMP 14、p JAK1和p STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05),p21蛋白水平显著升高(P<0.05)。miR 671 5p负调控CBX4表达,过表达CBX4降低了miR 671 5p过表达对SW480细胞增殖、迁移和侵袭及JAK1/STAT3信号通路的影响。结论miR 671 5p过表达可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用机制与下调CBX4表达、抑制JAK1/STAT3信号通路的激活有关。