苍耳子醇提取液的乙酸乙酯、正丁醇、水萃取物对大鼠肝脏的毒性作用

摘要

目的:研究苍耳子65%乙醇提取液的乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物对大鼠肝脏的毒性作用,为探讨苍耳子的毒性成分提供实验依据.方法:苍耳子碎粉22 kg,用8倍量乙醇浸泡6 h回流加热提取2 h,共提取2次,合并提取液,减压回收乙醇至无醇味,浓缩,浓缩液用石油醚萃取,回收石油醚;依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,回收有机溶剂,水层减压干燥.取苍耳子干燥乙酸乙酯萃取物4.8 g,正丁醇萃取物24 g和水萃取物56 g,各加含3%吐温-80生理盐水2 000 mL,分别配成浓度为0.002 4、 0.012 0和0.028 0 g/mL的混悬液.将SPF级雄性大鼠40只随机分成4组,每组10只.3个给药组大鼠分别用乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物的混悬液2.5 mL灌胃,2次/d (剂量分别为每天0.06 g/kg、0.3 g/kg、0.7 g/kg),空白对照组给予等体积的吐温80生理盐水灌胃,2次/d,均连续灌胃28 d.观察给药后大鼠外观、饮食和活动情况;并于给药前和给药开始后7、14、21、28 d称体重.第29天检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、总胆红素(TBil)和直接胆红素(DBil)的水平;之后,处死大鼠,计算肝脏指数,并进行肝脏组织学形态观察.结果:水萃取物组大鼠给药后7 d皮毛无光泽,活动及摄食量减少.正丁醇和水萃取物组大鼠给药后14、21d出现皮毛枯黄,精神萎靡,28 d出现竖毛,倦卧少动.乙酸乙酯萃取物组大鼠未见明显改变.正丁醇萃取物组大鼠给药开始后21、28 d体重分别为(240.6±24.1)和(255.1±21 3)g,水萃取物组大鼠给药开始后14、21、28d体重分别为(214.4±20.5)、(230.7±21.2)和(239.1±18.5)g,均明显低于同时间点空白对照组大鼠体重[分别为(251.7±27.2)、(280.7±38.2)和(306.2±36.5)g,(P＜0.05,P＜0.01)].正丁醇萃取物组AST为(112.6±24.3)U/L,明显高于空白对照组[(79.9±20.4)U/L, P＜0.01];水萃取物组ALT、AST和AKP分别为(51.1±3.9)、(112.9±16.6)和(198.4±41.8)U/L,明显高于空白对照组[(44.3±6.2)、(79.9±20.4)和(152 2±39 9)U/L,(P＜0.01,P＜0.05)];正丁醇萃取物组和水萃取物组肝脏指数分别为4.71±0.89和5.80±0.64,明显高于空白对照组3 14±0.33(P＜0.01).各给药组大鼠的TBil和DBil值有所增加,但与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).光镜观察可见正丁醇萃取物和水萃取物组大鼠肝细胞间隙增大、细胞核溶解、炎细胞浸润等病理改变.结论:苍耳子乙醇提取液的正丁醇萃取物及水萃取物对大鼠具有明显肝毒性作用.