ADAM17-shRNA转染的BMSCs对乳腺癌移植瘤ADAM17、EGFR和Ki-67的影响

摘要

目的 探讨利用裸鼠乳腺癌荷瘤模型转染解聚素-金属蛋白酶17 (ADAM17)-shRNA的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对乳腺癌移植瘤的抑制效果.方法 将人乳腺癌细胞(MCF-7)接种于30支裸鼠皮下,14 d后乳腺癌荷瘤裸鼠模型成功构建.随机分为:转染组(注射1×106/ml转染ADAM17-shRNA的BMSCs)、BMSCs组(注射1×106/ml BM-SCs)和对照组(注射空白PBS).采用贴壁筛选法分离、培养3周龄雄性SD大鼠的BMSCs,利用慢病毒介导将AD-AM17-shRNA转染第3代培养的BMSCs,将其通过尾静脉注射给各组荷瘤裸小鼠(0.1 ml/次)3d重复一次,共5次,观察各组裸小鼠肿瘤的生长状况.抑瘤实验16 d后处死裸鼠,HE染色法观察各组瘤体的形态结构,免疫组化法检测各组瘤体ADAM17、表皮细胞生长因子受体(EGFR)和细胞增殖核抗原(Ki-67)的表达.结果 转染组、BMSCs组、对照组裸鼠瘤体体积分别为(375.09±20.72)、(768.85±35.55)、(783.75±27.30) mm3,转染组相较于对照组移植瘤体积缩小,差异有统计学意义(P＜ 0.05),而BMSCs组差异无统计学意义.HE染色镜下可见,与对照组相比转染组可见瘤体组织大片坏死区域、坏死区域细胞崩解、细胞结构消失,而BMSCs组与对照组差异无统计学意义.转染组ADAM17、EGFR、Ki-67蛋白与对照组相比表达均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);BMSCs组和对照组相比较,差异无统计学意义.结论 ADAM17-shRNA通过BMSCs介导可靶向归巢至裸鼠乳腺癌移植瘤并发挥抑制裸鼠乳腺癌ADAM17、EG-FR和Ki-67表达的作用.