表面等离子共振测定CD45-FITC抗体与蛋白A特异性结合常数

摘要

运用表面等离子共振(SPR)平台建立测定CD45-FITC抗体与蛋白A特异性结合常数的方法.当偶联蛋白A的传感芯片上流过CD45-FITC抗体溶液时,双通道SPR仪实时监测CD45-FITC抗体与蛋白A特异性结合过程,获得了该反应不同温度下的结合速率常数ka、解离速率常数kd和结合平衡常数Ka,以及该反应的活化能Ea和焓变△H.结果表明该特异性结合比较适宜的条件是:中性或微碱性、较高的离子强度和较高的温度.该方法操作步骤简单、快速、灵敏度高、消耗样品少,是研究分析免疫球蛋白IgG抗体和蛋白A等生物分子相互作用比较理想的方法之一.