落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷抑制变异链球菌生长和生物膜形成的作用研究

摘要

[目的]研究落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷对变异链球菌生长和生物膜形成的影响.[方法]四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)用于分析落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷对变异链球菌生物膜形成的影响;用氧敏感性测试法检测落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷对变异链球菌氧敏感性的影响;用Real-time PCR方法检测基因的mRNA水平;采用人单核细胞检测了落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷的细胞毒性.[结果]落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷能显著抑制变异链球菌的生长和生物膜形成,而这种抑制作用呈现浓度依赖性.Real-time PCR实验发现,50 μg/mL落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷作用的生物膜中, brpA (transcriptional regulator)、recA (recombinase A)、nth (endonuclease Ⅲ)、luxS (S-ribosylhomocysteinase)、ffh (fifty four homologue)、smx (sulfamethoxazole)、gtfB (glucosyltransferase-Ⅰ)和gtfC (glucosyltransferase-SI)的mRNA表达水平均显著降低.同时研究发现,25、50、75 μg/mL的落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷对人单核细胞的生长和LDH活性均无影响.[结论]落叶松脂醇-4-β-D-吡喃葡糖苷具有抑制变异链球菌生长和生物膜形成的作用,分子水平可以下调brpA、recA、nth、luxS、ffh、smx、gtfB和gtfC等生物膜形成相关基因的mRNA表达水平,同时研究发现其无细胞毒性,因此有望成为抗菌治疗的潜在药物.