酵母菌色氨酸合成酶基因的克隆与表达

摘要

用BamHI酶切酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)1412-4D染色体DNA,通过蔗糖梯度分离2-4kb DNA片段并插入穿梭质粒pCN60,构成1412-4D基因文库。从基因文库中提取重组质粒,转化受体菌C9(α,trp5,adel,ade6),用直接功能互补法,分离到9株重组质粒,它们都含有3.2kb的TRP5 DNA片段,分别命名为pCN60(trp5)_(1-9)。转化体中色氨酸合成酶的酶活水平比原始菌株1412-4D高3倍。