黑曲霉N25植酸酶phyA基因的克隆及序列分析

摘要

通过对黑曲霉N25植酸酶phyA基因PCR扩增,获得了一条长约1.6kb的特异性PCR产物,并进行了酶切鉴定.然后在pUC18质粒中构建了含有目的基因片段的克隆质粒pFNP1.DNA序列测定表明,目的基因片段含有植酸酶phyA基因的完整序列,phyA基因全长1506bp,其中包含一段长102bp的内含子,编码467个氨基酸,5'端有一段编码19个氨基酸的信号肽序列.黑曲霉N25与产植酸酶酶活最高的天然黑曲霉标准菌株NRRL3135的植酸酶phyA基因(GenBank Accession:M94550)相比较,其同源性为96.746%,编码的氨基酸序列同源性为97.64%.将黑曲霉N25植酸酶phyA基因序列及其相应的氨基酸序列在国际基因库中注册(注册号分别为:AF218813,AAF25481.1),此基因是目前中国在国际基因库中注册的第一个植酸酶phyA基因.