大肠杆菌VT噬菌体受体(vpr)基因突变株的鉴定

摘要

近年来大肠杆菌O157引起的人和动物的发病率呈上升趋势[1-3]，O157的强致病性与很多因子有关，如：粘附因子、肠溶血素(Enterohaemolysin,Ehx)、Vero毒素(Vero toxin，VTs)等。VT可致人和动物的腹泻、出血性肠炎、溶血性尿毒综合证、血栓、血球减少性紫癜等疾病[4]，是O157主要的致病因子。大量的研究表明VT是由λ家族具有vT基因的噬菌体(vT—phage)编码的[5]，且在噬菌体感染宿主菌的裂解状态时由晚期调节基因调控毒素的产生。可见大肠杆菌O157所产的vT与vT噬菌体的感染有关。大肠杆菌表面是否存在噬菌体的受体为众多科学工作者所关注，1999年Saunders等在大肠杆菌染色体中克隆出一段与VT2噬菌体敏感性有关的基因[6]，将其定名为vpr(verotoxin phage receptor)。为了进一步确定vpr基因的功能，本试验利用同源重组的方法，将已经构建的含vpr基因片段的重组自杀性质粒pYYvpr，转化到含全长vpr基因的大肠杆菌MC1061，经PCR和southern blot鉴定，获得一株染色体同源基因突变株，并对其进行生物学特性研究，初步证实该基因与噬菌体的裂解性感染有关。