球毛壳菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因克隆及特性分析

摘要

用粗糙脉孢菌(Neurospora crassa,XP-327967)和菜豆炭疽病菌(Colletotrichum lindemuthianu, P35143)的甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)氨基酸序列对球毛壳菌(Chaetomium globosum)菌丝ESTs序列本地数据库进行tBlastn检索,获得了球毛壳菌GAPDH全长cDNA序列.该序列长1240bp,开放阅读框1014bp,编码337个氨基酸组成的多肽,蛋白分子量为36.1kD.用PCR方法克隆了该基因的DNA序列,序列长为1556bp,由2个内含子和3个外显子组成.BlastP同源性分析表明该基因与鹅掌柄孢壳(Podospora anserine)同源性最高为95%;与米曲霉(Aspergillus oryzae)同源性最低为87%.GAPDH酵母转化子生物功能分析表明转化子对Na2CO3和高温有高的耐受性,证明GAPDH为抗胁迫基因.该基因的cDNA序列、DNA序列及推测的氨基酸序列在GenBank登录(登录号分别为AY522719,AY593253,AAS01412).