慢病毒介导的PYROXD1沉默对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移、侵袭和EMT的影响

摘要

目的 研究慢病毒介导的PYROXD1沉默对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响.方法 qRT-PCR和Western blot方法检测乳腺癌细胞和正常乳腺细胞中PYROXD1 mRNA和蛋白表达变化.乳腺癌细胞MCF-7分成Control、Lv-sh-NC(转染阴性对照慢病毒载体)、Lv-sh-PYROXD1(转染PYROXD1 shRNA慢病毒载体)、Lv-sh-PYROXD1+LiCl组(转染PYROXD1 shRNA慢病毒载体后以Wnt/β-catenin信号激活剂LiCl处理),CCK-8实验检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测E-cadherin、Vimentin、β-catenin、c-myc蛋白表达.结果 乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、T47D中PYROXD1蛋白和mRNA水平明显高于正常乳腺上皮细胞MCF-10A;乳腺癌细胞MDA-MB-231、T47D中PYROXD1蛋白和mRNA水平明显低于乳腺癌细胞MCF-7.与Control、Lv-sh-NC组比较,Lv-sh-PYROXD1组乳腺癌细胞MCF-7中PYROXD1蛋白和mRNA表达水平降低,细胞存活率、迁移数目、侵袭数目以及细胞中Vimentin、β-catenin、c-myc蛋白表达水平均降低,E-cadherin蛋白表达水平升高.与Lv-sh-PYROXD1组比较,Lv-sh-PYROXD1+LiCl组乳腺癌细胞存活率、迁移数目、侵袭数目以及细胞中Vimen-tin、β-catenin、c-myc蛋白表达水平均升高,E-cadherin蛋白表达水平降低.结论 慢病毒介导的PYROXD1沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号降低乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移、侵袭和EM T能力.