大鼠脊神经蛋白质组研究中双向电泳技术的建立

摘要

目的 探讨双向凝胶电泳技术在大鼠脊神经组织蛋白质组研究中的应用.方法 应用高蛋白溶解度裂解液提取正常大鼠脊神经组织蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦电泳和垂直板SDS-PAGE电泳结合的方法进行蛋白质的分离,使用银染和考马斯亮蓝两种方法分别对凝胶进行染色.结果 正常大鼠脊神经组织样品在18 cm pH 3～10非线性固相pH梯度干胶条,12.5%的Acr-Bis PAGE的胶上可分离到900个左右蛋白点,不同凝胶间蛋白点平均匹配率为80%.结论 实验所采用的高离液剂体系的裂解液,及对第一向和第二向电泳过程中各个因素及环节的把握,是获得大鼠脊神经组织蛋白质双向电泳图谱的关键.