越橘低温响应因子VcICE1的克隆和功能鉴定

摘要

为挖掘越橘低温胁迫响应基因在低温逆境胁迫应答中的作用,探讨越橘低温逆境胁迫响应机制,以北陆越橘为试材,克隆低温响应基因VcICE1(Inducer of CBF3 expression 1),分析其表达模式及对低温的响应,探讨VcICE1在抵御低温胁迫中的生物学功能.利用农杆菌介导法获得转基因拟南芥,比较转基因和野生型拟南芥对低温胁迫响应的差异.利用瞬时转化烟草叶片试验,分析VcICE1对AtCBF3的转录调控.结果表明,克隆获得越橘低温响应因子VcICE1,该基因ORF为1566 bp,编码含有522个氨基酸的蛋白质,含有1个保守的bHLH结构域.系统进化分析表明,VcICE1与AtICE1同源性最高.表达分析显示,VcICE1在根、枝条、幼叶、花和果实中均表达,在幼叶中表达量最高,在果实中最低,并响应低温处理.在拟南芥中异位表达VcICE1,其低温抗性较野生型显著升高.瞬时表达试验结果表明,VcICE1可激活AtCBF3的表达.VIc CE1能够对低温处理有明显响应,推测其在响应低温胁迫过程中发挥重要的调控作用.