豆类丝核菌中生物碱的提取及苦马豆素含量测定

摘要

将豆类丝核菌菌株7-1、7-3接种于改良Czapek′s培养基,置25～27℃培养箱培养14 d.收集菌丝体,自然干燥后乙醇索氏提取,回收乙醇至糖浆状,H2O:CH2Cl2(3:1,v/v)萃取,水层调pH10后,再用H2O:CH2Cl2(3:1,v/v)萃取,水层调pH7,浓缩后上732型强酸性阳离子交换树脂,用1 mol/LNH4OH洗脱,收集氨洗液,调pH7,浓缩后冻干,得到一种浅黄色粉末.取苦马豆素标准品100μg及浅黄色粉末提取物10mg,分别用1ml吡啶溶解,取0.1ml加BSTFA 0.1ml,50℃水浴30min.取反应液1μl,直接进样作GC.结果表明,在相同的气相色谱条件下,在相同出峰时间(1.2～8 min)内,标准品的峰形与总生物碱的峰形完全一致,可以判定生物碱中含有苦马豆素.根据计算得出菌株7-1、7-3生物碱中苦马豆素含量为5.903 mg/g和7.006 mg/g.u0000性阳离子交换树脂,用1 mol/LNH4OH洗脱,收集氨洗液,调pH7,浓缩后冻干,得到一种浅黄色粉末.取苦马豆素标准品100μg及浅黄色粉末提取物10mg,分别用1ml吡啶溶解,取0.1ml加BSTFA 0.1mlu000050℃水浴30min.取反应液1μl,直接进样作GC.结果表明,在相同的气相色谱条件下,在相同出峰时间(1.2～8 min)内,标准品的峰形与总生物碱的峰形完全一致,可以判定生物碱中含有苦马豆素.根据计算得出菌株7-1、7-3生物碱中苦马豆素含量为5.903mg/g和7.006mg/g。