农杆菌介导犁苞滨藜NHX基因转化苜蓿的影响因素

摘要

以新牧1号杂花苜蓿(Medicago varia Martin.cv.Xinmu No.1)和新疆大叶苜蓿(Medicago sativa L.cv.Xinjiang Daye)无菌苗叶片和子叶为材料,通过根癌农杆菌EHA105介导转化犁苞滨藜NHX耐盐基因,提高植株耐盐性.本文对农杆菌转化条件进行研究,结果表明:以预培养3 d的子叶为转化受体,菌液浓度OD600为0.4～0.5时,浸染10～15 min,然后转入附加20～30 mg/L乙酰丁香酮的共培养基,培养4 d,可以获得较高的转化效率;对抗性芽的PCR检测初步证明,外源基因整合到苜蓿的基因组中.