异苞滨藜BADH基因启动子的分离及表达载体的构建

摘要

为了进一步提高转BADH基因植株的胁迫抗性,分离强胁迫诱导型启动子,以生长在新疆北部干旱沙漠地带的异苞滨藜(Atriplex micrantha)为研究对象,依据已经克隆的BADH基因cDNA序列,参照陈柏君等的方法,分离到长为1 509 bp的5'端上游序列(Genebank:HM230828),预测其转录起始位点为T(+1),位于ATG翻译起始位点的上游82 bp处,同时还发现了一段新的内含子序列(260 bp)。经PLACE和PLANT CARE软件分析,发现此序列具有启动子的基本转录元件:TATA盒和CAAT盒,包含多个抗逆调控元件:ABA响应元件(ABRE),水杨酸诱导元件(-58bp),热激(HSE)、低温(LTRE1)、干旱(DRE)、伤害诱导元件(WUN)等。并首次发现许多其他的胁迫诱导元件:铜胁迫元件(Cu)、真菌诱导元件(AM)、糖信号转导元件(Sugar)、厌氧和低二氧化碳调控元件,植物激素响应元件(ARR1)以及多个光调控元件(Light)和转录因子响应元件(WRKY、CBF、MYB),因此,推测分离到一个新的强胁迫诱导型启动子。同时构建了BADH-P-a-3301和BADH-P-b-3301两个植物表达载体。