重组人脂联素对SD大鼠胫骨骨折愈合过程的影响

摘要

背景 脂联素是血清中最普遍的脂肪因子,可以影响骨形成和骨吸收.而脂联素能否促进骨折愈合仍未确定.目的 研究重组人脂联素对SD大鼠胫骨闭合性骨折愈合的影响.方法 使用2月龄SD雄性大鼠24只,体质量约200?g,采用骨折造模器制作SD大鼠胫骨骨折模型.造模成功后,将大鼠随机分为3组(每组n=8),并即刻局部注射0.5?mL药物1次,治疗1组注射脂联素剂量为1?mg/kg、治疗2组注射脂联素剂量为2?mg/kg,对照组注射等量0.9％氯化钠注射液.在造模成功后第6周时处死大鼠并取出双侧胫骨,通过HE染色观察骨痂结构,Masson染色评价骨痂成熟度,免疫荧光染色观察成骨相关因子表达,micro-CT检测骨痂微结构评价脂联素对SD大鼠胫骨骨折愈合的影响.结果 骨折后6周时HE染色显示:治疗组骨痂明显增厚,板层骨形成均优于对照组.Masson染色显示:治疗组大鼠胫骨骨痂处胶原蛋白更多,骨痂成熟度优于对照组.免疫荧光染色显示:脂联素1?mg/kg组和2?mg/kg组在骨膜处、骨陷窝和生发层处的促成骨因子骨钙素(osteocalcin,OCN)表达量(0.61％±0.21％和0.44％±0.17％?vs?0.27％±0.17％)、碱性磷酸酶(alkaline?phosphatase,ALP)表达量(0.85％±0.62％和0.70％±0.34％?vs?0.35％±0.15％)均高于对照组(P<0.05).micro-CT分析显示:脂联素1?mg/kg治疗组骨痂处骨体积分数(BV/TV)(53.76±7.89?vs?26.37±4.32)％、骨小梁厚度(Tb.Th)?[(363.9±51.45)?μm?vs?(269.6±36.80)?μm]、骨小梁数量(Tb.N)?[(15.68±2.11)/cm?vs?(10.51±1.49)/cm]和骨小梁分离度(Tb.Sp)[(344.6±98.79)?μm?vs?(604.3±78.27)?μm]均优于对照组(P<0.05).脂联素2?mg/kg治疗组骨痂处BV/TV?45.10％±5.45％、Tb.N(14.4±1.83)/cm和Tb.Sp(436.1±63.75)?μm也优于对照组(P<0.05),骨小梁厚度与对照组比较,差异无统计学意义.脂联素1?mg/kg组与2?mg/kg组各指标差异无统计学意义.结论 脂联素可以促进SD大鼠的骨痂生长,骨微结构重建,促进成骨因子表达,缩短骨折愈合时间.