环境雌激素双酚AF诱导神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系增殖与侵袭的体外实验

摘要

目的 探讨环境雌激素双酚AF(bisphenol AF,BPAF)对神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y增殖,及雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)转录活性的影响.方法 SH-SY5Y细胞转染ERE-Luc或CatD-Luc荧光素酶报告基因后,使用0.01 μ mol/L、0.03μmol/L、0.1μmol/L、0.3μmol/L、1μmol/L、3μmol/L和10μmol/L浓度梯度的BPAF处理SH-SY5Y细胞,采用荧光素酶报告基因实验(luciferase)检测BPAF对ER α转录活性的影响;使用BPAF作用诱导ER α转录活性的ECmax浓度处理SH-SY5Y细胞,采用CCK-8实验检测细胞样品在450 nm波长的吸光度值;在ERα表达阴性的三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-231中转染ERα表达载体;在SH-SY5Y细胞中转染ERα的小干扰RNA (siRNA)或使用ERα的拮抗剂ICI-182780 (100 nmol/L)预处理SH-SY5Y细胞后,检测BPAF对ERα转录活性的诱导作用或对SH-SY5Y细胞增殖/侵袭的促进作用.结果 BPAF能够剂量依赖性地(R2=0.94,P=0.007 6)在SH-SY5Y细胞中提高ERα的转录活性,其EC50值为(0.44±0.09)μmol/L,ECmax值为3μmol/L;在SH-SY5Y细胞中转染ER α的siRNA载体,或使用ERα的拮抗剂(100 nmol/L ICI-182780)处理SH-SY5Y细胞能够显著下调BPAF诱导的ERα转录活性(抑制率分别为76.97％和77.75％),及其对SH-SY5Y细胞增殖(抑制率分别为77.42％和86.76％)、侵袭的促进作用(抑制率分别为95.87％和105.56％).结论 BPAF可能通过诱导ERα的转录活性,促进神经母细胞瘤细胞系的增殖与侵袭.