Coleusin因子诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y分化及信号调控的机制研究

摘要

目的:研究CF活性因子(Coleusin Factor,CF)抗肿瘤活性因子诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞向正常分化及相关周期信号分子的调控机制. 方法:以人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y为实验模型,将CF作用于SH-SY-5Y细胞,采用细胞活力测定技术、免疫细胞化学技术、流式细胞仪分析技术以及酶联免疫印迹技术,检测CF对SH-SY5Y细胞活力、形态、细胞周期分布的影响以及诱导SH-SY5Y细胞分化过程中分化标记蛋白和细胞周期相关蛋白分子的表达.并检测CF与维甲酸联合用药的作用. 结果:细胞形态观察可见CF可以诱导神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y分化为似正常神经元样细胞;诱导神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y分化后微管细胞骨架发生明显变化;CF能够使SH-SY5Y细胞周期阻滞于G0/G1期;下调SH-SY5Y细胞周期相关蛋白P53的表达量及RB蛋白的磷酸化水平;诱导SH-SY5Y细胞分化过程中分化标记蛋白GAP-43和Bcl-2的表达量逐渐上升. 结论:在CF诱导SH-SY5Y细胞分化过程中,诱导SH-SY5Y细胞分化为似正常神经元样细胞;使SH-SY5Y细胞微管细胞骨架改变,通过下调SH-SY5Y细胞周期相关蛋白P53的表达及RB蛋白的磷酸化水平;上调控SH-SY5Y细胞分化标记蛋白GAP-43和Bcl-2的表达;阻滞CFSH-SY5Y细胞向S期移行.结果表明:CF因子能够诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞向正常分化.